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科研体系

蛋白表达

蛋白表达概述

蛋白表达是指将外源目标基因(DNA或RNA)导入合适的宿主细胞中,利用宿主细胞的转录、翻译及翻译后修饰系统,生产出具有特定结构和功能的重组蛋白的过程。它是基因工程与细胞工程的核心应用之一。

目的

通过蛋白表达得到天然来源难以获取的蛋白如胰岛素、生长激素等等;表达特定蛋白可用于体外研究蛋白特性,蛋白结构解析等,同时表达野生型蛋白、突变体蛋白、融合蛋白等得到更具应用价值的高质量蛋白,如疫苗、靶向抗体药物、药物递送蛋白等等。

分类

按宿主细胞分类,主要有原核表达(大肠杆菌)、真核表达(酵母、昆虫、哺乳动物细胞)
按表达周期分类,分为瞬时表达以及稳定表达
按目标蛋白存在位置分类,胞内表达、分泌表达以及膜展示

方法

原核表达体系:将含目标蛋白基因的表达质粒转化至表达菌中,通过IPTG诱导,即可产生目标蛋白,优点是便捷、低成本、产量高;缺点是缺乏真核翻译后修饰(糖基化、二硫键等),易形成包涵体。
真核表达系统:
酵母表达系统酵母可高密度发酵又可以进行翻译后修饰,兼具了原核和真核宿主细胞的优点,纯化时收集培养液方便纯化,适用于可分泌表达蛋白。
昆虫细胞表达系统对蛋白有翻译修饰作用,杆状病毒容量大,适用于大分子蛋白,VLP等生产。
哺乳动物细胞如CHO,293F等表达细胞系,提供最接近天然的人源糖基化修饰,是治疗性蛋白和抗体的金标准,但成本高、周期长

技术特点

我公司已成功建立原核表达体系、昆虫细胞表达体系、哺乳动物细胞表达体系并成功表达多种蛋白,如单抗,VLP等。我们公司结合目标蛋白的使用目的以及蛋白特性选用适配的表达体系,对目标基因进行密码子优化,设计表达方案,以达到快速高效表达目标蛋白的目的。

  • 咨询电话:+86 029-87014200

  • 邮箱:sxkyn@foxmail.com

  • 陕西省杨凌示范区渭惠路东段农科大厦2号楼10层21022室

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