
细胞融合(Cell fusion)是指在自然或人工诱导条件下,将两个或两个以上的细胞合并成一个双核或多核细胞(合胞体)的过程,是细胞工程的核心技术之一。
细胞融合不仅可用于细胞遗传、肿瘤发生、组织再生等基础研究,还可广泛应用于微生物学、育种、单克隆抗体制备等重要方向,已成为现代生物技术的重要手段。
按融合方式分可分为自发融合和诱发融合。当同种细胞在培养时,两个相邻细胞自发合并,为自发融合;异种细胞经诱导剂处理所发生的细胞融合,称诱发融合。
按细胞来源分可分为同种细胞融合(如骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞)、异种细胞融合(如人鼠细胞杂交)异科/异属细胞融合(亲缘关系更远)
1、生物方法:仙台病毒融合法,利用灭活仙台病毒作为融合剂进行细胞融合,但由于病毒制备困难、操作复杂、批次间差异性大,其应用受到限制。
2、化学方法:聚乙二醇(PEG)融合法:华裔科学家高国楠上世纪70年代以高分子量PEG作为融合剂成功诱发了植物原生质体之间的融合,建立了PEG融合法,有力推动了细胞融合技术发展。
3、物理方法:
电融合法:在交流电场中使细胞排队,再施加直流脉冲穿孔融合,效率高、对细胞损伤小
激光融合法:利用激光微束或光镊精确操控并融合单个细胞对
微流体融合:在微流控芯片中实现单细胞配对与可控融合(前沿技术)
我公司主要利用细胞融合技术将免疫动物淋巴细胞与同系动物肿瘤细胞融合,以达到获得可传代的杂交瘤细胞的目的,可以分泌产生大量同质性抗体。以此方法筛选单克隆抗体。其中,细胞融合的效率是杂交瘤细胞技术的关键环节。此外获得杂交瘤细胞后通过基因分析获得目标基因序列结合我司的细胞转染技术构建稳定CHO细胞系,得到高产单克隆抗体细胞株,从而提高单克隆抗体产能。